2011年臨床助理醫(yī)師:體細胞雜交法
更新時間:2011-12-01 13:41:10
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體細胞是生物體除生殖細胞外的所有細胞。將從身體分離的體細胞做組織培養(yǎng)進行遺傳學研究的學科稱為體細胞遺傳學。體外培養(yǎng)細胞可人為控制或改變環(huán)境條件,并可建立細胞株,長期保存,進行各種正常和病理研究。與基因定位有關(guān)的是體細胞雜交。細胞雜交又稱細胞融合,是將來源不同的兩種細胞融合成一個新細胞。大多數(shù)體細胞雜交是用人的細胞與小鼠、大鼠或倉鼠的體細胞進行雜交。這種新產(chǎn)生的融合細胞稱為雜種細胞,含有雙親不同的染色體。雜種細胞有一個重要的特點是在其繁殖傳代過程中出現(xiàn)保留嚙齒類一方染色體而人類染色體則逐漸丟失,最后只剩一條或幾條,其原因至今不明。這種僅保留少數(shù)甚至一條人染色體的雜種細胞正是進行基因連鎖分析和基因定位的有用材料。由于人和鼠類細胞都有各自不同的生化和免疫學特征,Miller等運用體細胞雜交并結(jié)合雜種細胞的特征,證明雜種細胞的存活需要胸苷激酶(TK)。
但凡含有人第17號染色體的雜種細胞都因有TK活性而存活,反之則死亡。從而推斷TK基因定位于第17號染色體上。這是首例用細胞雜交法進行的基因定位。由此可見,研究基因定位時,由于有雜種細胞這一工具,只需要集中精力于某一條染色體上,就可找到某一基因座位。
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