初級檢驗技士輔導：炭疽芽胞桿菌微生物檢驗
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初級檢驗技士輔導：炭疽芽胞桿菌微生物檢驗 $lesson$
微生物檢驗
(1)標本采集：皮膚炭疽取病灶分泌物;肺炭疽取痰液;腸炭疽取糞便或嘔吐物;炭疽腦膜炎取腦脊液;各型炭疽均可采取血液。
(2)檢驗方法及鑒定：炭疽桿菌的檢驗要特別注意芽孢型的實驗室感染。
1)直接鏡檢：將可疑材料涂片，1：1000的升汞固定5分鐘，再行革蘭染色和莢膜染色。鏡檢發(fā)現(xiàn)有莢膜的革蘭陽性、兩端平截、竹節(jié)狀排列形成長鏈桿菌，可作初步報告。
2)分離培養(yǎng)：一般接種血瓊脂平板，35℃培養(yǎng)18-24h后可觀察到較大、灰白色、邊緣不整齊和有輕微溶血的菌落。
3)鑒定
?、俅樵囼灒簩⒋龣z菌接種于含青霉素0.05―0.5U/ml的培養(yǎng)基經(jīng)37℃培養(yǎng)6h后，炭疽桿菌可發(fā)生形態(tài)變化，顯微鏡下見大而均勻的圓球狀菌體呈成串樣排列，類炭疽桿菌及其他需氧菌無此現(xiàn)象。本試驗鑒別意義較大。
②噬菌體裂解試驗：
取用37℃、4-6h待檢肉湯培養(yǎng)物，涂布于普通瓊脂平板，將AP631炭疽噬菌體1滴，于平板中央劃一直線，置37℃18h，出現(xiàn)噬菌斑或噬菌帶者為陽性，每份標本應作2-3個同樣的試驗，同時滴種肉湯液作陰性對照。
?、壑靥妓猁}生長毒力試驗：
將待檢菌接種于含0.5%NaHCO3和10%馬血清的瓊脂平板上，置10%CO2環(huán)境37℃24-48h，有毒株形成莢膜，菌落呈粘液型，無毒株不形成莢膜，呈粗糙型菌落。
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將待檢菌分別接種于青霉素5、10、100U/ml的普通瓊脂平板，37℃培養(yǎng)24h，炭疽芽胞桿菌一般在含5U/ml的青霉素平板上仍能生長，在含10、100U/ml青霉素的平板上受到抑制而不生長。
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炭疽桿菌菌體多糖是某些植物凝集素受體，用凝集素試驗檢測炭疽桿菌。常用的方法有熒光標記試驗和酶聯(lián)凝集素吸附試驗。本試驗可與其他類炭疽芽胞桿菌相鑒別。
5)判斷標準：
革蘭陽性、兩端平整、竹節(jié)狀成雙或短鏈排列，有莢膜的粗大桿菌，或莢膜腫脹試驗陽性，串珠試驗陽性;重碳酸鹽毒力試驗出現(xiàn)粘液型菌落可作出診斷。