2012年初級檢驗技師基礎知識：酶活性測定樣品的貯存與處理

　　如果在測定活性之前所貯的樣品酶活性有了降低，無論所用的儀器如何先進，也不能獲得準確的結果。在適當?shù)臈l件下酶會失活，因而必須強調在收集樣品之后應盡可能快速測試酶活性，最好當天進行測定。關于酶樣品的貯存與處理應注意以下幾點：$lesson$

　　1.酶活力測定最常用的樣品是血清或血漿。制備血漿所用的抗凝劑可抑制某些酶的活性，如EDTA能抑制ALP，草酸鹽抑制LDH，肝素對CK及某些其他酶有輕微的抑制作用，故一般樣品以血清為佳。

　　2.多數(shù)血清酶以較高濃度存在于紅細胞、白細胞或血小板中。因此分離血清時應注意避免溶血。

　　3.光照對CK活性有抑制作用，因此，主張CK測定的血清應貯存于4℃的暗處，測定時應該注意避光。

　　4.由于血清白蛋白對酶蛋白有穩(wěn)定作用，在它的存在下，某些酶在室溫下可保存1～2天而無明顯失活。

　　5.有些酶由于自身的特性，在貯存時需特別加以注意。例如LDH同工酶在冰箱保存不穩(wěn)定，在室溫反而穩(wěn)定時間較長，所以測定LDH活力的血清樣品，應置于室溫下，2～3天內可保持穩(wěn)定，不能存放冰箱過夜。

　　6.由于酶很容易發(fā)生表面變性，因此在操作時應避免形成泡沫。

　　7.巰基對于大多數(shù)酶來說是十分重要的，可能起如下幾方面的作用：①參與催化;②和底物結合;③組成變構部位;④維持酶的三級或四級結構。因此，使巰基保持天然狀態(tài)是使許多酶穩(wěn)定化的最重要的條件之一，基于這個理由，在酶的活性測定、抽提、制備以及保存過程中，常可添加-SH保護劑，如半胱氨酸、谷胱甘肽、2-巰基乙醇、二硫蘇糖醇、二硫赤蘚糖醇等。

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