白喉桿菌臨床診斷-2018執(zhí)業(yè)醫(yī)師考試醫(yī)學微生物學精華考點


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白喉桿菌臨床診斷:
臨床上疑似白喉的病人不必等待檢驗結果,應立即給予抗毒素和抗生素治療。但對于白喉流行期的首例病人應做微生物學檢驗予以證實。
(一)直接染色鏡檢
用棉拭采取假膜邊緣部滲出物,涂片,用奈瑟氏染色或美蘭染色,鏡檢有無含異染顆粒的棒狀桿菌。結合臨床癥狀,可作出初步診斷。確診必須通過細菌培養(yǎng)并進行毒力試驗。
(二)凝固血清棉拭培養(yǎng)法
將沾有馬或牛血清的棉拭子放在無菌試管內,經8~10磅蒸氣滅菌20~30分鐘,并使血清凝固,且此凝固血清棉拭采取病人咽部標本,置37℃培養(yǎng)8~10小時后,直接涂片鏡檢。此法可作為大量檢查時快速培養(yǎng)診斷之用。
(三)培養(yǎng)檢查
將棉試檢材接種于雞蛋斜面或血清凝固斜面培養(yǎng)基及亞碲酸鉀平板培養(yǎng)基上,置37℃培養(yǎng),待斜面或平板上長出典型的灰色疑菌落,挑取轉種到雞蛋呀或血清斜面進行分離培養(yǎng),以供進一步形態(tài)染色或毒力試驗鑒定。
(四)毒力試驗
1.豚鼠試驗
取體重250g豚鼠2只,其中一只試驗前12小時,由腹腔注射白喉抗毒素250~500單位,供做對照。然后對照。然后各于皮下注射48小時的培養(yǎng)液2ml,若于2~4天注射抗毒素的豚鼠死亡,而對照豚鼠存活,便證明所試驗菌株為有毒白喉桿菌。
2.E平板試驗
將浸有白喉抗毒素的無菌濾紙條貼在含20%馬血清的瓊脂平板上,然后沿濾紙條垂直方向劃線接種待測細菌,同時也接種已知產毒株和不產毒株做為對照。37℃培養(yǎng)48小時后,若待檢菌株產生白喉外毒素,則在濾紙條和劃線生長的菌苔交界外出現(xiàn)白色沉淀線。
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